簡(jiǎn)要描述:自發(fā)光蛋白Marker(15-135KD)含有6個(gè)純化的蛋白質(zhì),均含有可被小鼠、兔子和山羊等各類抗體識(shí)別的基團(tuán),當(dāng)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光(ECL)檢測(cè)時(shí),6個(gè)蛋白質(zhì)由于結(jié)合了相應(yīng)的抗體,也可以發(fā)光,從而達(dá)到自發(fā)光的效果。
詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
---|---|---|---|
分子式 | / | 純度 | / |
分子量 | / | 貨號(hào) | AP13L092 |
規(guī)格 | 250ul | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 用于監(jiān)控一抗、二抗和ECL過程。 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
EZ Mark自發(fā)光蛋白Marker(WB)含有6個(gè)可自發(fā)光的純化蛋白質(zhì),分子量從23 ~117 KD,均含有可被小鼠、兔子和山羊等各類抗體識(shí)別的基團(tuán)。當(dāng)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光(ECL)檢測(cè)時(shí),6個(gè)蛋白質(zhì)由于結(jié)合了相應(yīng)的抗體,也可以發(fā)光,從而達(dá)到自發(fā)光的效果。自發(fā)光Marker發(fā)出的光與目的蛋白質(zhì)條帶發(fā)的光一樣,可以通過X光膠片曝光或者ECL發(fā)光成像儀進(jìn)行檢測(cè)。
EZ Mark自發(fā)光蛋白Marker(WB)具有可提供精確的分子量標(biāo)準(zhǔn)(6個(gè)蛋白質(zhì)中的5個(gè)都經(jīng)過質(zhì)譜的鑒定,為精確分子量,質(zhì)譜圖請(qǐng)咨詢),可用于監(jiān)控一抗、二抗和ECL過程,以及目的條帶大小ECL后可以直接比較等優(yōu)點(diǎn)。
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
自發(fā)光蛋白Marker(15-135KD) | AP13L092 | 250ul | 380 |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20 ℃保存,有效期36個(gè)月。
使用方法
自發(fā)光Marker室溫融化后可以在SDS-PAGE膠中直接上樣。自發(fā)光Marker的使用量,一般5 μL即可。如有必要,也可根據(jù)您使用膠的厚度、上樣孔的寬度、一抗和二抗的種類、滴度以及ECL液的靈敏度等相關(guān)因素進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整,一般在2~10 μL之間。
轉(zhuǎn)膜后,進(jìn)行正常的封閉、一抗和二抗孵育,最后進(jìn)行ECL發(fā)光檢測(cè)。
蛋白發(fā)光液染色后,可以同時(shí)檢測(cè)到6個(gè)自發(fā)光條帶和目的條帶(如圖1B所示)。目的條帶的大小一目了然。
產(chǎn)品效果
圖1. 《雙色預(yù)染Marker 和自發(fā)光Marker套裝》實(shí)驗(yàn)效果圖
《雙色預(yù)染Marker》經(jīng)電泳并轉(zhuǎn)膜后的效果圖。
《自發(fā)光Marker》經(jīng)ECL后的效果圖。
《雙色預(yù)染Marker》和《自發(fā)光Marker》合并后的彩色效果圖。
《雙色預(yù)染Marker》和《自發(fā)光Marker》合并后的黑白效果圖。實(shí)驗(yàn)條件:12% SDS-PAGE膠,一抗為小鼠Anti-Actin抗體,二抗為HRP標(biāo)記的山羊抗小鼠抗體。泳道1:預(yù)染Marker; 泳道2:自發(fā)光Marker;泳道3:細(xì)胞裂解樣品。【注】:《自發(fā)光Marker》中的117.52 kDa條帶未經(jīng)質(zhì)譜鑒定,為理論分子量,別的5個(gè)條帶均已經(jīng)過質(zhì)譜鑒定,為實(shí)際分子量。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
自發(fā)光Marker和預(yù)染Marker可以根據(jù)您的喜好選擇上樣方式,既可以分開來上樣,也可以在同一個(gè)泳道上兩種Marker。
如果同一個(gè)泳道上兩種Marker時(shí),最好先將兩種Marker在離心管中勻混后,再上樣,如此操作,Marker的條帶會(huì)更清晰。
自發(fā)光Marker上樣量過大時(shí)可能會(huì)有微弱的雜帶,可以通過減少上樣量來解決。
自發(fā)光Marker可以與本公司的預(yù)染Marker一起使用,更有利于全程監(jiān)控Western Blot所有環(huán)節(jié)。
WB常見問題分析及解決方案詳見李記生物微信公眾號(hào)《蛋白電泳那些事兒》系列。
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