線粒體染色試劑盒可做的事情還蠻多的
更新時間:2018-07-10 點擊次數:1354
線粒體染色試劑盒可以標記活細胞中的線粒體,使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物,屬線粒體選擇性染料,該染料能輕易進入活細胞內,通過線粒體膜電位變化滲透進入線粒體,并在線粒體中富集。Smart Cell線粒體染色試劑盒提供了標記線粒體的全套試劑,能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇,既可單獨使用,也支持對細胞的多重熒光分析。這種的細胞標簽為從空間上和時間上研究發生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。
線粒體染色試劑盒檢測原理,L-谷氨酰胺是人體蛋白質所必需的20種氨基酸之一。是人體內zui普遍的、不可缺乏的條件性必需氨基酸,是構成蛋白質*的氨基酸之一,更是某些細胞培養中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不穩定的特性,在細胞培養基的整合中,易自發性分解為谷氨酸和氨離子,而氨離子對細胞的毒性很強,因此,在細胞培養體系中,須密切關注谷氨酰胺的儲存壽命(SHELF LIFE)和實時監測。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的雙酶循環反應系統中,L-谷氨酰胺首先發生脫氨基反應,產生谷氨酸和氨離子。
線粒體染色試劑盒細胞染色,貼壁細胞,在96孔板(100μL)或培養皿內培養細胞,當細胞達到70-80%融合度,在96孔板或培養皿內添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養基按1:1)替換色染液。同TRITC設置在顯微鏡下進行熒光觀察。注意:如果細胞沒有充分染色,可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善。懸浮細胞: 在1000 rpm 條件下離心細胞培養液5分鐘,棄去上清,用預熱好的細胞培養液溫和的重懸細胞,然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)在37°C, 5% CO2條件下培養細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養基按1:1)替換色染液。同TexasRed設置在顯微鏡下進行熒光觀察。